Online SPE-二維液相色譜搞定維生素 A/D/E 同時檢測

更新時間：2025-10-20

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維生素是嬰幼兒配方奶粉中的必需營養(yǎng)成分，對嬰兒生長發(fā)育至關重要。依據(jù)國家標準《GB 10765-2021 食品安全國家標準嬰幼兒配方食品》和《GB 10766-2021 食品安全國家標準較大嬰兒配方食品》等的規(guī)定，嬰幼兒配方奶粉中必須添加14種維生素，其中包括脂溶性維生素A、D、E。維生素A具有支持視力發(fā)育（如預防夜盲癥）和免疫系統(tǒng)完善的功效；維生素D可促進鈣吸收，強化骨骼發(fā)育；維生素E又名生育酚，是 α、β、γ 和 δ-生育酚等脂溶性維生素的總稱，具有抗氧化作用，可保護細胞免受損傷。

本報告參考《T/SHFCA 002-2024 特殊醫(yī)學用途配方食品中維生素A、D、E的測定在線固相萃取-二維液相色譜法》，采用在線固相萃取方法，使用悟空K2025二維液相色譜系統(tǒng)，同時測定嬰幼兒配方奶粉中維生素A、D、E的含量。該方法摒棄了復雜的樣品前處理步驟，在保證分析結果準確性的前提下，顯著優(yōu)化了樣品分析流程，大幅提升了樣品分析效率。

實驗原理

試樣經(jīng)皂化后，皂化液經(jīng)離心、過濾后注入二維液相色譜系統(tǒng)；試樣通過在線固相萃取柱濃縮凈化后，經(jīng)一維色譜柱分離維生素A和維生素E（α、β、γ 和 δ-生育酚）；再通過中心切割，維生素D經(jīng)閥切換、捕集后由二維色譜柱分離為維生素D₂和D₃。通過保留時間定性，外標法定量。

儀器配置與色譜條件

圖1 悟空K2025二維液相色譜系統(tǒng)

圖2 在線固相萃取-二維高效液相色譜法同時分析V_A、V_D、V_E閥切換示意圖

表1 二維液相系統(tǒng)色譜條件

實驗結果

圖3 混合標準溶液連續(xù)進樣6針疊加色譜圖

注：1：VA；2：δ-VE；3：β-VE；4：γ-VE；5：α-VE；6：VD₂；7：VD₃

對V_A、V_D、V_E混合標準溶液進行測試及重復性考察（圖3），三種維生素均具有極佳的峰形；如表2所示，β-VE和γ-VE的分離度為1.76，VD₂和VD₃的分離度為2.35，均可實現(xiàn)良好分離。如表3所示，三種維生素保留時間RSD均≤0.09 %，峰面積的RSD均≤0.72 %，具有良好的定性定量重復性。

標準品的V_A、V_D、V_E在其線性濃度范圍內(nèi)均呈現(xiàn)良好的線性關系，相關系數(shù)R均≥0.9999。

圖4 嬰幼兒配方奶粉樣品一維和二維色譜圖

注：1：VA；2：δ-VE；3：β-VE；4：γ-VE；5：α-VE；6：VD₂；7：VD₃

嬰幼兒配方奶粉試樣中V_A、V_D、V_E的含量范圍為0.0 mg/100g~10 mg/100g；兩次獨立測定結果的相對偏差范圍為-0.85 %~4.58 %，滿足《T/SHFCA 002-2024 特殊醫(yī)學用途配方食品中維生素A、D、E的測定在線固相萃取-二維液相色譜法》中規(guī)定的在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算數(shù)平均值的15%的要求；加標回收實驗中， V_A、V_D、V_E的回收率范圍為98.0 %~106.0 %。